油包水微液滴制备步骤及注意事项

油包水微液滴是液滴制备中比较常见的，那么在油包水微液滴的制备中需要有哪些关键步骤和参数呢？

1. 选择合适的油相与表面活性剂

为了确保液滴的稳定性，选择适合的油相和表面活性剂至关重要。例如，在矿物油中加入6% Span-80、在棕榈酸异丙酯中加入6% EM-180或者在HFE-7500电子氟化液中加入2%全氟表面活性剂都可以作为有效的油相体系来生成稳定的液滴。不同的油相体系对于液滴生成的流速要求不同，使用Drop-Surf氟油可以实现极高的流速下稳定生成液滴(Vwater=40μL/min)。

2. 采用微流控芯片技术

利用微流控芯片技术是目前制备油包水液滴的一种常用方法。通过微流控芯片，可以精确控制液体流动并形成大小均匀的液滴。根据需要生成的液滴数量，可以选择"T"字形或"十"字形的芯片设计。如果需要高通量生成液滴，则建议选择"T"字形芯片。

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3.调整流体参数

为了得到理想的液滴尺寸，需要调整多种因素，主要包括：

微通道的尺寸、几何形状及润湿性质；

进样系统的精度和稳定性；

各种流体的流速、相对流速及总流速；

连续相和分散相流体的物理性质；

表面活性剂的类型和浓度；

这些参数的优化能够影响最终液滴的质量和一致性。

4.使用改性蛋白提高稳定性

在某些情况下，可以在水相中添加dspe-peg-bsa改性蛋白作为稳定剂。这种改性蛋白不仅能够降低水相体系的表面张力，而且在PCR高低温循环过程中还能变性交联成类似固态的蛋白膜，从而显著提高油包水微滴的稳定性。

5.设备与操作

实际操作时，可以使用基于压力或注射的液滴微流控系统来进行液滴生成。这些系统允许用户精确地调节液体流量，并且可以通过实时监控来保证实验条件的一致性。

正确制备油包水微液滴需要综合考虑油相选择、微流控芯片设计、流体参数调整以及可能使用的特殊添加剂等因素。每一步骤都需要精心规划以达到最佳效果。

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