食品中人工添加剂的快速检测
合成色素以苯、甲苯、萘等化工产品为原料，经过磺化、硝化、卤化、偶氮化等一系列有机反应制成合成着色剂，合成着色剂有一定毒性，过多食用会危害人体健康，但由于人工合成着色剂成本低、色泽鲜艳、着色力强、色调多样，故被广泛使用；合成着色剂有严格的控制使用范围和最大使用量，因此食品中合成色素的准确测定具有重要意义。
对于食品中合成着色剂的检测目前可借鉴国标GB/T 5009.35-2003《食品中合成着色剂的测定》，分别采用高效液相色谱法，薄层色谱法，示波极谱法进行定性定量分析，其中高效液相色谱法前处理采用聚酰胺吸附法或液-液分配法进行色素提取。
该方案特别适用于食品中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红和亮蓝等人工合成着色剂的检测。
1、样品准备
1.1 可乐样品
取1 g可乐(加热超声驱除二氧化碳)，40 μL甲酸于试管中，摇匀，作为上样液待净化。
1.2 红薯粉样品
(1) 取2 g样品 与20 mL提取剂*混合，涡旋2 min，超声提取10 min，6000 rpm下离心3 min，收集上清液；
(2) 将下层残留物依次用10 mL、10 mL提取剂重复提取两次，合并三次提取上清液；
(3) 将上清液在45℃水浴条件下，减压蒸馏至6 mL，再加入80 μL甲酸，混匀，待净化。
提取剂*：氨水+70%乙醇（1+99，体积比）。
2 、SPE柱净化——ProElut PLS 500 mg/6 mL（Cat.#：68005）
2.1 可乐样品SPE柱净化流程
(1) 活化/平衡：
5 mL甲醇活化，5 mL水平衡，流出液弃去；
(2) 上 样：
将待净化液加入小柱，流出液弃去；
(3) 淋 洗：
5 mL 2%甲酸水溶液，流出液弃去，将小柱抽干；
(3) 洗 脱：
4 mL 2%氨水-甲醇溶液洗脱，收集流出液，2%氨水-甲醇溶液调至中性；
(4) 重新溶解：
在40 ℃下用减压蒸馏将收集液浓缩至近干，然后用50%甲醇水溶液定容至1 mL后供HPLC分析。
2.2 红薯粉样品SPE柱净化流程
(1) 活 化：
5 mL甲醇，5 mL水活化；
(2) 上 样：
加入待净化液，弃去流出液；
(3) 淋 洗：
加入4 mL水，弃去流出液，将SPE柱抽干；
(4) 洗 脱：
加入6 mL 2%氨水甲醇溶液，收集流出液；
(5) 重新溶解：
将洗脱液在45 ℃下氮气吹至约0.5 mL，再用水定容至1 mL，微孔滤膜过滤后供HPLC分析。
3、分析条件
色谱柱：
Inspire C18，250 × 4.6 mm，5 μm
流 速：
1.0 mL/min
检测器：*
UV 254 nm
柱 温：
35℃
进样量：
20 μL
流动相：
A：乙腈，B：0.02 mol/L 乙酸铵溶液
梯度
|
时间（min） |
0 |
20 |
30 |
31 |
40 |
|
A（%） |
5 |
30 |
37 |
5 |
5 |
|
B（%） |
95 |
70 |
63 |
95 |
95 |
4、添加回收结果
4.1 红薯粉添加回收结果
红薯粉中人工合成着色剂（添加水平为5 mg / kg）的添加回收结果
|
目标物 |
柠檬黄 |
苋菜红 |
胭脂红 |
日落黄 |
诱惑红 |
亮蓝 |
|
回收率 |
83.46% |
83.18% |
87.84% |
94.59% |
93.90% |
101.28% |
4.2可乐添加回收结果
|
分析物 |
添加水平(mg/kg) |
回收率/% |
RSD(n*=4)/% |
|
柠檬黄 |
1.6 |
97.9 |
3.77 |
|
苋菜红 |
2.4 |
97.1 |
2.77 |
|
靛 蓝 |
2.4 |
72.3 |
3.73 |
|
胭脂红 |
3.2 |
98.2 |
1.31 |
|
日落黄 |
2.8 |
90.8 |
2.19 |
|
亮 蓝 |
10.4 |
96.5 |
0.84 |
|
赤藓红 |
7.2 |
90.7 |
2.49 |
*n：平行样品的数量
标签: 食品安全 人工添加剂 快速检测